Sistem RPA-CRISPR/Cas12a dalam kajian ini mencapai pengesanan HCMV yang cepat (30–40 min), ultra-sensitif (1 salinan/μL) dengan menyasarkan-gen UL123 yang dinyatakan awal, mengatasi kaedah konvensional dalam ujian sampel klinikal. Inovasi ini membolehkan diagnosis jangkitan virus rendah- tepat pada masanya- pesakit imunokompromi dan menggariskan kebolehlaksanaan diagnostik berasaskan CRISPR{11}}untuk meningkatkan pengurusan penyakit berkaitan HCMV{12}}. Kesederhanaan dan kecekapan ujian menyerlahkan potensinya sebagai-titik{15}}alat penjagaan untuk sumber-tetapan terhad.
Corak tapak penguatan RPA dan pemilihan kit.
(A) Reka bentuk primer RPA mengenai lokasi serpihan amplifikasi. Anak panah menunjukkan kedudukan asas dari awal hingga akhir serpihan yang dikuatkan dengan primer P1-P6.
(B) Imej elektroforesis gel agarose bagi produk RPA dikuatkan dengan 6 set primer HCMV.
(C) Penapisan kecekapan amplifikasi kit RPA daripada syarikat yang berbeza. P: Primer, NC: Kawalan Negatif.
Keputusan menunjukkan bahawa kit AmpFuture mempamerkan kecekapan amplifikasi tertinggi.
Perbandingan kadar positif MIRA-CRISPR/Cas12a, PCR - Kaedah Siasatan Pendarfluor dan qPCR dalam sampel klinikal.
Kami mengumpul sampel darah dan air kencing daripada 48 pesakit klinikal. DNA Genomik telah diekstrak daripada sampel ini menggunakan Kit DNA Genomik TIANamp dan hasil pengesanan UL122 dianalisis melalui kaedah kuar pendarfluor{3}PCR. Membandingkan keputusan kami dengan diagnosis klinikal, kaedah kami mengenal pasti 6 sampel positif yang negatif dalam ujian klinikal.
