Dalam bidang sains tumbuhan, pengesanan RNA yang tepat dan cekap memainkan peranan penting dalam memahami fisiologi tumbuhan, diagnosis penyakit, dan penyelidikan genetik. Kaedah tradisional penguatan dan pengesanan RNA sering datang dengan batasan seperti masa pemprosesan yang panjang, keperluan peralatan kompleks, dan keperluan untuk makmal khusus. Di sinilah langkah -langkah kit penguatan isotermal RNA sebagai permainan - changer. Sebagai pembekal kit ini, saya teruja untuk meneroka bagaimana kit penguatan isoterma RNA dilakukan dalam pengesanan RNA tumbuhan.
Prinsip penguatan isoterma RNA
Sebelum menyelidiki prestasinya dalam pengesanan RNA tumbuhan, penting untuk memahami prinsip di sebalik kit penguatan isoterma RNA. Tidak seperti tindak balas rantai polimerase yang biasa diketahui (PCR), yang memerlukan berbasikal haba antara suhu yang berbeza untuk denaturasi DNA, penyepuhlindapan, dan lanjutan, penguatan isoterma berlaku pada suhu malar. Kesederhanaan ini menghapuskan keperluan untuk Cyclers Thermal yang mahal, menjadikannya lebih mudah untuk di tapak atau sumber - tetapan terhad.
Terdapat beberapa teknik penguatan isoterma, seperti penguatan isoterma (LAMP) dan urutan berasaskan urutan nukleik (NASBA), yang sering digunakan dalam kit ini. Lampu, sebagai contoh, menggunakan satu set primer khas yang mengiktiraf pelbagai urutan tertentu pada RNA sasaran. Dengan bantuan polimerase DNA yang menggantikan, ia dapat dengan cepat menguatkan RNA sasaran di bawah keadaan isoterma, menghasilkan sejumlah besar amplicons DNA yang dapat dikesan dengan mudah.
Kelebihan dalam pengesanan RNA tumbuhan
Kepekaan
Salah satu petunjuk prestasi utama bagi mana -mana kaedah pengesanan RNA adalah kepekaan. Kit penguatan isoterma RNA telah menunjukkan kepekaan yang sangat baik dalam mengesan RNA tumbuhan. Dalam kajian tumbuhan, walaupun jejak jumlah RNA tertentu, seperti yang berasal dari jangkitan virus atau ekspresi gen yang jarang berlaku, boleh menjadi maklumat penting. Proses penguatan isoterma secara eksponen dapat menguatkan RNA yang rendah ini ke tahap yang dapat dikesan.
Sebagai contoh, dalam mengesan virus tumbuhan, yang sering wujud dalam titers yang sangat rendah pada peringkat awal jangkitan, kit boleh mengambil RNA virus dengan ketepatan yang tinggi. Pengesanan awal ini penting untuk menghalang penyebaran penyakit tumbuhan dan memastikan kesihatan tanaman.
Kekhususan
Kekhususan adalah satu lagi aspek penting. Primer yang digunakan dalam kit penguatan isoterma RNA direka dengan teliti untuk mengenali hanya RNA tumbuhan sasaran. Kekhususan tahap tinggi ini mengurangkan kemungkinan hasil yang palsu - positif. Dalam persekitaran RNA kompleks tumbuhan, di mana terdapat banyak RNA endogen dari gen dan organisma yang berbeza, keupayaan untuk mensasarkan urutan RNA yang dikehendaki adalah kelebihan yang ketara.
Sebagai contoh, apabila membezakan antara virus tumbuhan yang berkait rapat atau mengesan ketegangan tertentu virus, primer spesifik dapat membezakan RNA sasaran dengan tepat dari orang lain, memberikan hasil yang boleh dipercayai untuk pengenalan patogen tumbuhan.
Kelajuan
Kelajuan adalah kelebihan yang ketara dari kit penguatan isoterma RNA dalam pengesanan RNA tumbuhan. Kaedah berasaskan PCR tradisional boleh mengambil masa berjam -jam untuk disiapkan, termasuk penyediaan sampel, berbasikal haba, dan analisis hasil. Sebaliknya, penguatan isoterma dapat mencapai penguatan yang signifikan dalam masa 30 - 60 minit.
Masa pemulihan yang cepat ini sangat bermanfaat dalam tetapan pertanian, di mana keputusan cepat perlu dibuat mengenai pengurusan penyakit tumbuhan. Sebagai contoh, dalam rumah hijau atau ladang skala besar, jika tumbuhan menunjukkan gejala jangkitan virus yang berpotensi, kit penguatan isoterma RNA dapat memberikan hasil dalam masa sejam, membolehkan para petani mengambil tindakan segera untuk mencegah penyebaran penyakit.
Kesederhanaan
Kesederhanaan kit penguatan isoterma RNA menjadikannya mesra pengguna, walaupun untuk pengguna bukan pakar. Oleh kerana ia beroperasi pada suhu malar, tidak perlu menubuhkan parameter berbasikal haba yang kompleks. Komponen tindak balas biasanya dicampur dalam kit, mengurangkan kemungkinan kesilapan semasa eksperimen.
Kesederhanaan ini bermakna pengesanan RNA tumbuhan boleh dijalankan di lapangan, secara langsung di tapak koleksi sampel tumbuhan. Sebagai contoh, peternak tumbuhan boleh menggunakan kit yang betul di lapangan untuk cepat skrin untuk kehadiran ciri -ciri genetik yang dikehendaki atau penyakit dalam jenis tumbuhan baru.
Format pengesanan yang berbeza
Syarikat kami menawarkan pelbagai format pengesanan untuk memenuhi keperluan yang berbeza dalam pengesanan RNA tumbuhan.
Jalur ujian asid nukleik
TheMIRA DNA Isothermal Rapid Amplification Kit Asid Nucleic Test StripMenyediakan cara yang mudah dan visual untuk mengesan RNA tumbuhan yang diperkuatkan. Selepas tindak balas penguatan isoterma, produk tindak balas ditambah ke jalur ujian. Sama seperti ujian kehamilan, garis yang kelihatan di jalur menunjukkan hasil positif. Format ini sangat mudah untuk pengesanan tapak, kerana ia tidak memerlukan peralatan mahal untuk membaca hasil. Ia boleh digunakan di kawasan pertanian terpencil atau semasa tinjauan lapangan, di mana keputusan cepat dan mudah diperlukan.
Pengesanan pendarfluor
TheMira DNA Isothermal Rapid Amplification Kit PendarfluorMenggunakan pewarna neon untuk mengesan RNA tumbuhan yang diperkuatkan. Semasa proses penguatan isoterma, pewarna neon mengikat kepada amplicon DNA yang baru disintesis, dan peningkatan intensiti pendarfluor dapat diukur menggunakan fluorometer. Kaedah ini lebih kuantitatif berbanding dengan kaedah jalur ujian. Ia boleh memberikan maklumat mengenai jumlah RNA sasaran dalam sampel, yang berguna untuk kajian mengenai tahap ekspresi gen atau titer virus dalam tumbuhan.
Format asas
TheMIira DNA Isothermal Rapid Amplification Kit Asasadalah format yang lebih tradisional yang boleh digunakan bersamaan dengan kaedah pengesanan lain, seperti elektroforesis gel. Selepas penguatan isoterma, produk tindak balas boleh dijalankan pada gel agarose untuk memvisualisasikan band DNA yang diperkuatkan. Format ini sesuai untuk analisis makmal yang lebih mendalam, yang membolehkan para penyelidik mengkaji lebih lanjut ciri -ciri RNA yang diperkuatkan, seperti saiz dan kesuciannya.
Real - Aplikasi Dunia dalam Penyelidikan Loji
Dalam kejuruteraan genetik tumbuhan, kit penguatan isoterma RNA digunakan untuk mengesan ekspresi transgenes dalam tumbuhan yang diubahsuai secara genetik. Ini membantu para penyelidik dengan cepat mengesahkan sama ada gen yang diperkenalkan telah disalin dengan betul ke RNA, yang penting untuk kejayaan proses pengubahsuaian genetik.
Untuk diagnosis penyakit tumbuhan, seperti yang dinyatakan sebelum ini, mengesan RNA virus atau kulat dalam tumbuhan adalah penting untuk mencegah wabak penyakit. Kit penguatan isoterma RNA boleh digunakan untuk menyaring sejumlah besar sampel tumbuhan dalam masa yang singkat, membolehkan pengesanan awal dan rawatan tepat pada masanya.
Dalam pembiakan tumbuhan, kit boleh digunakan untuk mengesan penanda RNA tertentu yang berkaitan dengan ciri -ciri yang dikehendaki, seperti rintangan penyakit atau potensi hasil yang tinggi. Dengan cepat mengenal pasti tumbuh -tumbuhan dengan ciri -ciri ini, penternak dapat mempercepatkan proses pembiakan dan mengembangkan jenis tumbuhan baru dengan lebih cekap.
Menggalakkan hubungan untuk membeli
Kit penguatan isoterma RNA menawarkan prestasi yang sangat baik dalam pengesanan RNA tumbuhan dari segi kepekaan, kekhususan, kelajuan, dan kesederhanaan. Jika anda terlibat dalam penyelidikan tumbuhan, pertanian, atau mana -mana bidang yang berkaitan dengan analisis RNA tumbuhan, kit kami boleh menjadi alat yang tidak ternilai untuk kerja anda. Kami menjemput anda untuk menghubungi kami untuk maklumat lanjut dan membincangkan keperluan khusus anda. Sama ada anda memerlukan pembelian skala besar untuk projek penyelidikan atau kuantiti yang kecil untuk ujian lapangan, kami bersedia memberikan anda penyelesaian dan sokongan terbaik.
Rujukan
- Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, et al. Gelung - Penguatan isoterma DNA yang ditengahi. Asid nukleik Res. 2000; 28 (12): E63.
- Compton J. urutan asid nukleik - Penguatan berasaskan. Alam. 1991; 350 (6313): 91 - 92.
- Goto N, Nikkuni K, Hase T. Pengesanan virus tumbuhan oleh kaedah berasaskan asid nukleik. J Gen Plant Pathol. 2009; 75 (6): 339 - 348.