ပြန်လည်ပေါင်းစည်းမှု၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းကိုမည်သို့အကျိုးသက်ရောက်သနည်း။

မော်လီကျူးဇီဝဗေဒ၏ဘုံတွင်မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာပြန်လည်တောင်းခံမှုဖြစ်စဉ်သည် DNA ပြုပြင်ခြင်း, မျိုးရိုးဗီဇမျိုးစုံမျိုးစုံနှင့်မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာအချက်အလက်များနှင့်မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာအချက်အလက်များကိုပြန့်ပွားခြင်းတို့အပါအ 0 င်ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာအချက်အလက်များတွင်အဓိကအခန်းကဏ် plays မှပါ 0 င်သည်။ Recombinases သည် DNA မော်လီကျူးများအကြားမျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာပစ္စည်းများဖလှယ်မှုကိုဖြစ်ပေါ်စေသည့်အင်ဇိုင်းများဖြစ်သည်။ ပြန်လည်တည်ဆောက်မှု၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည်တုံ့ပြန်မှုအပေါ်မည်သို့အကျိုးသက်ရောက်သည်ကိုနားလည်ခြင်းသည် Biotechnology တွင်အခြေခံသုတေသနနှင့်လက်တွေ့ကျသောအသုံးချမှုများအတွက်ကြီးမားသောအရေးပါမှုကိုနားလည်ခြင်းသည်နားလည်မှုရှိသည်။ ဦး ဆောင် rectombinase ပေးသွင်းသူအနေဖြင့်ကျွန်ုပ်တို့သည်ဤခေါင်းစဉ်ကိုစူးစမ်းလေ့လာခြင်းနှင့်အရည်အသွေးမြင့်မားခြင်းဆိုင်ရာပြန်လည်သုံးသပ်ခြင်းထုတ်ကုန်များကိုစူးစမ်းလေ့လာခြင်းနှင့်အရည်အသွေးပြည့်ဆောင်မှုပေးသည့်ထုတ်ကုန်များကိုရှာဖွေရန်အလွန်အမင်းပါ 0 င်ပတ်သက်နေသည်။

rectombinase ၏အခြေခံ - ဖျန်ဖြေလက်မှတ်

ပြန်လည်ပေါင်းစည်းမှုသည်အထူးပြုပရိုတိန်းများသည်တိကျသော DNA ဆုံများကိုအသိအမှတ်ပြုပြီး Homologous DNA မော်လီကျူးများအကြားမျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာပစ္စည်းဖလှယ်ခြင်းကိုမြှင့်တင်ပေးသည့်အထူးပြုပရိုတင်းများဖြစ်သည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်သည်ပြန်လည်ပြုပြင်ခြင်းဆိုင်ရာ DNA DNA မှ DNA DNA မှ Synaptic DNA SEATSTS နှင့် Synaptic DNA segrands များနှင့် DNA Strands ၏ cleavage နှင့် dna strands ၏ချည်နှောင်ခြင်းအပါအ 0 င်ဤလုပ်ငန်းစဉ်သည်အဆင့်ဆင့်၏စည်းနှောင်ခြင်းအပါအ 0 င်အဆင့်များစွာပါဝင်သည်။

ပြန်လည်ထူထောင်ခြင်းဆိုင်ရာပြန်လည်ထူထောင်မှုနှုန်းသည်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးပြန်လည်ထူထောင်ရေးနှုန်းသည်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးလုပ်ငန်းစဉ်မည်မျှလျင်မြန်စွာဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်ကိုတိုင်းတာသည်။ ၎င်းသည်အပူချိန်, PH ကဲ့သို့သောအချက်များစွာများအပေါ်လွှမ်းမိုးမှုခံရသည်။ ဒီဘလော့ဂ်မှာ rectombinase အာရုံစူးစိုက်မှုရဲ့အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုတုံ့ပြန်မှုနှုန်းအပေါ်အထူးအာရုံစိုက်ပါလိမ့်မယ်။

recombinase အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်တုံ့ပြန်မှုနှုန်း၏သီအိုရီထည့်သွင်းစဉ်းစား

အင်ဇိုင်း Kinetics ၏အခြေခံမူများအရအင်ဇိုင်း၏တုံ့ပြန်မှုနှုန်း - catalyzed တုံ့ပြန်မှုသည်ယေဘုယျအားဖြင့်အင်ဇိုင်း၏အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်သက်ဆိုင်သည်။ နိမ့်အင်ဇိုင်းအာရုံစူးစိုက်မှုမှာ, တုံ့ပြန်မှုနှုန်းသည်အင်ဇိုင်းအာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်တိုက်ရိုက်အချိုးကျသည်။ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော်အနိမ့်အနိမ့်အနေဖြင့်အနိမ့်အမြင့်ဆုံးတွင်အလွှာများနှင့်ချည်နှောင်ထားသည့်အင်ဇိုင်းမော်လီကျူးများနည်းပါးသည် (ဤကိစ္စတွင် DNA) ။ ပြန်လည်ထူထောင်ခြင်း၏အာရုံစူးစိုက်မှုတိုးလာသည်နှင့်အမျှအင်ဇိုင်းများပိုမိုများပြားလာသည်။

သို့သော်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးအာရုံစူးစိုက်မှုဆက်လက်မြင့်တက်လာသည်နှင့်အမျှတုံ့ပြန်မှုနှုန်းသည်နောက်ဆုံးတွင် VMAX ဟုလူသိများသောအများဆုံးတန်ဖိုးကိုရရှိလိမ့်မည်။ ဤအချိန်တွင်အလွှာမော်လီကျူးများအားလုံးသည်အင်ဇိုင်းမော်လီကျူးများနှင့်ပြည့်နှက်နေပြီးအင်ဇိုင်းများထပ်မံထည့်သွင်းခြင်းကတုံ့ပြန်မှုနှုန်းကိုတိုးမြှင့်မည်မဟုတ်ချေ။ ဤအပြုအမူကို Michaelis - Movenen Equmation မှ Michaelsis Moven Equation မှဖော်ပြနိုင်သည်။

ပြန်လည်ထူထောင်ခြင်းဆိုင်ရာပြန်လည်ထူထောင်ရေးအခြေအနေတွင်ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းခြင်းနှင့်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းအကြားဆက်နွယ်မှုသည်ပိုမိုရှုပ်ထွေးနိုင်သည်။ ပြန်လည်ပေါင်းစည်းခြင်းများသည်အခြားပရိုတိန်းများနှင့် CO - CO - CO - အချက်များနှင့်အတူဖျော်ဖြေပွဲများတွင်အလုပ်လုပ်ကြသည်။ Synaptic Sountains ၏ဖွဲ့စည်းခြင်းသည်ပါဝင်ပတ်သက်သောအစိတ်အပိုင်းများ၏ stoichiometry ကြောင့်ထိခိုက်နိုင်သည့် multi-step လုပ်ငန်းစဉ်ဖြစ်သည်။

တုံ့ပြန်မှုနှုန်းအပေါ်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးအာရုံစူးစိုက်မှု၏အကျိုးသက်ရောက်မှု၏အကျိုးသက်ရောက်မှု၏စမ်းသပ်သက်သေအထောက်အထား

ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းခြင်း၏အကျိုးသက်ရောက်မှု၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုစုံစမ်းစစ်ဆေးရန်မြောက်မြားစွာစမ်းသပ်လေ့လာမှုများပြုလုပ်ခဲ့သည်။ ဥပမာအားဖြင့်, Vytro recombination asays တွင်သုတေသီများသည်ပြန်လည်ထူထောင်ရေး၏အာရုံစူးစိုက်မှုအမျိုးမျိုးကိုလေ့လာပြီးဂျယ်လ် Electrophoresis သို့မဟုတ် fluorescence ကဲ့သို့သောနည်းစနစ်များကို အသုံးပြု. ပြန်လည်ထူထောင်ရေး၏ထိရောက်မှုကိုတိုင်းတာသည်။

များစွာသောကိစ္စရပ်များတွင်ဤစမ်းသပ်မှုများသည်အချို့သောအကွာအဝေးအတွင်းပြန်လည်ထူထောင်ရေးအာရုံစူးစိုက်မှုကိုတိုးမြှင့်ခြင်းကတုံ့ပြန်မှုနှုန်းသိသိသာသာတိုးပွားလာကြောင်းပြသခဲ့သည်။ သို့သော်အချို့သောတံခါးခုံများထက် ကျော်လွန်. adzyme kinetics ၏သီအိုရီဟောကိန်းများနှင့်ကိုက်ညီမှုနှင့်ကိုက်ညီမှုနှုန်းမြှင့်တင်ခြင်းတို့ဖြစ်သည်။

အဆင့်မြင့်ပြန်လည်ထိန်းွှတ်မှုအာရုံစူးစိုက်မှုဖြင့်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းကိုအဆင့်သတ်မှတ်ခြင်းအတွက်ဖြစ်နိုင်ချေရှိသောရှင်းပြချက်တစ်ခုမှာအကျိုးဖြစ်ထွန်းသောအနေဖြင့်အကျိုးဖြစ်ထွန်းသောစည်းမျဉ်းစည်းကမ်းများသို့မဟုတ်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးလုပ်ငန်းစဉ်များတွင်ဝင်ရောက်စွက်ဖက်မှုများဖြစ်ပေါ်လာခြင်းဖြစ်သည်။ ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းမှုမြင့်မားသောအာရုံစူးစိုက်မှုသည် DNA ကိုသတ်သတ်မှတ်မှတ်မဟုတ်သော DNA ကိုသတ်သတ်မှတ်မှတ်မဖြစ်စေနိုင်ပါ။

ဇီဝနည်းပညာများအတွက်လက်တွေ့ကျသောသက်ရောက်မှုများ

ပြန်လည်စုစည်းမှုအာရုံစူးစိုက်မှုသည်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းသည်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းသည်ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာ applications များအတွက်အရေးကြီးသောလက်တွေ့ကျသောသက်ရောက်မှုများရှိသည်ကိုနားလည်သဘောပေါက်ခြင်း။ ဥပမာအားဖြင့် Crispr - Cas9 ကဲ့သို့သောမျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာတည်းဖြတ်ရေးနည်းပညာများတွင် Homologous recombination များကိုတိကျသောမျိုးရိုးဗီဇပြုပြင်ခြင်းများကိုမိတ်ဆက်ရန်အသုံးပြုနိုင်သည်။ Recombinase ၏အာရုံစူးစိုက်မှုကိုပိုကောင်းအောင်ပြုလုပ်ခြင်းသည်မျိုးရိုးဗီဇတည်းဖြတ်ခြင်း၏ထိရောက်မှုကိုမြှင့်တင်ပေးနိုင်သည်။

ထို့အပြင် cloning နှင့် expression များအတွက် recomomsicant DNA မော်လီကျူးထုတ်လုပ်မှုတွင်မြင့်မားသောထိရောက်သောပြန်လည်ထူထောင်ရေးအတွက်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးကိုပြန်လည်အာရုံစူးစိုက်မှု၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည်အလွန်အရေးကြီးသည်။ Recombinase အာရုံစူးစိုက်မှုကိုဂရုတစိုက်ချိန်ညှိခြင်းအားဖြင့်သုတေသီများသည် dnoscant dNA ထုတ်ကုန်များ၏အထွက်နှုန်းနှင့်အရည်အသွေးကိုတိုးတက်စေနိုင်သည်။

rectombinasing prodier အနေဖြင့်ကျွန်ုပ်တို့သည်အပါအ 0 င်အရည်အသွေးမြင့် Recombinase ထုတ်ကုန်များကိုကျွန်ုပ်တို့ကမ်းလှမ်းသည်sc recack 2.0မြင့်မားသော - ထိရောက်မှုပြန်လည်ထူထောင်ရေးအတွက်အကောင်းဆုံးကိုအကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ထုတ်ကုန်များသည်စွမ်းဆောင်ရည်နှင့်ယုံကြည်စိတ်ချရမှုများကိုသေချာစေရန်သုတေသီများအား၎င်းတို့၏စမ်းသပ်ချက်တွင်တိကျမှန်ကန်ပြီးပြန်လည်ဖော်ပြနိုင်သောရလဒ်များကိုရရှိရန်ခွင့်ပြုရန်သေချာစွာစမ်းသပ်စစ်ဆေးသည်။

rectombinase အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်အတူအပြန်အလှန်အခြားအချက်များ

ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းခြင်းနှုန်းအပေါ်ပြန်လည်ထုတ်ယူခြင်းအာရုံစူးစိုက်မှု၏အကျိုးသက်ရောက်မှုသည်အထီးကျန်ခြင်း၌မဖြစ်ပေါ်ကြောင်းသတိပြုရန်အရေးကြီးသည်။ အခြားအချက်များသည်ပြန်လည်ပေါင်းစည်းရေးထိရောက်မှုကိုလွှမ်းမိုးရန်ပြန်လည်စုစည်းမှုအာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်နိုင်သည်။

အပူချိန်တစ်ခုမှာထိုကဲ့သို့သောအချက်တစ်ချက်ဖြစ်ပါတယ်။ ကွဲပြားခြားနားသော redocomaginases သည်လှုပ်ရှားမှုအတွက်အကောင်းဆုံးအပူချိန်ရှိသည်။ Sub - အကောင်းဆုံးအပူချိန်များ၌တုံ့ပြန်မှုနှုန်းသည်နိမ့်ကျနိုင်သည်။ ပြန်လည်အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းအကြားဆက်နွယ်မှုကိုပြောင်းလဲနိုင်သည်။ ဥပမာအားဖြင့်, အပူချိန်နိမ့်လွန်းပါက DNA သို့ပြန်လည်ထူထောင်ရေးသည်ချို့ယွင်းချက်များကိုချို့ယွင်းနိုင်ပြီးပြန်လည်ထူထောင်ရေးအာရုံစူးစိုက်မှုများကိုတိုးမြှင့်ခြင်းအားဖြင့်လျော့နည်းသွားသောလှုပ်ရှားမှုအတွက်အပြည့်အဝလျော်ကြေးပေးမည်မဟုတ်ပါ။

CO - အချက်များရှိနေခြင်းသည်လည်းအလွန်အရေးကြီးသည်။ rectombinases သည်သင့်လျော်သောလုပ်ဆောင်မှုအတွက် ATP ကဲ့သို့သောတိကျသော CO - အချက်များလိုအပ်သည်။ ဤကုမ္ပဏီများ၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးလုပ်ငန်းများကိုပြန်လည်ပြုပြင်ခြင်းနှင့် DNA နှင့်အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်မှုကိုအကျိုးသက်ရောက်နိုင်သည်။ အကယ်. CO - SETORE အာရုံစူးစိုက်မှုကန့်သတ်ထားပါကပြန်လည်စုစည်းမှုအာရုံစူးစိုက်မှုကိုတိုးမြှင့်ခြင်းသည်တုံ့ပြန်မှုနှုန်းတွင်အချိုးကျတိုးပွားလာခြင်းမပြုနိုင်ပါ။

rectombinase ထုတ်ကုန်များ၏အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု

Recombinase ထုတ်ကုန်များပေးသွင်းသူတစ် ဦး အနေဖြင့်ကျွန်ုပ်တို့သည်အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု၏အရေးပါမှုကိုကျွန်ုပ်တို့နားလည်ပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ပြန်လည်ထူထောင်ရေးများကိုပြည်နယ် - အနုပညာထုတ်လုပ်မှုလုပ်ငန်းစဉ်များကို အသုံးပြု. ထုတ်လုပ်သည်။ ပြန်လည်ပေါင်းစည်းမှုအသုတ်တစ်ခုစီသည်တိကျသောစမ်းသပ်ရလဒ်များအတွက်အရေးပါသောတသမတ်တည်းလုပ်ဆောင်မှုအဆင့်ရှိကြောင်းသေချာပါသည်။

ကွဲပြားခြားနားသော application များအတွက်အကြံပြုထားသည့်အာရုံစူးစိုက်မှုအကွာအဝေးအပါအ 0 င်အသေးစိတ်အချက်အလက်များကိုလည်းကျွန်ုပ်တို့ပေးပါသည်။ ၎င်းသည်ကျွန်ုပ်တို့၏ဖောက်သည်များအားသူတို့၏စမ်းသပ်ချက်များကိုအကောင်းဆုံးဖြစ်စေပြီးအကောင်းဆုံးရလဒ်များကိုရရှိရန်ခွင့်ပြုသည်။ ဖြည့်စွက်ကာsc recack 2.0အခြားသောအခြားဆက်စပ်ထုတ်ကုန်များကိုလည်းကျွန်ုပ်တို့လည်းကမ်းလှမ်းသည်DNA ကို polymerase 2.0နှင့်MLV H - 2.0မော်လီကျူးဇီဝဗေဒ applications အမျိုးမျိုးအတွက်ကျွန်ုပ်တို့၏ပြန်လည်ထူထောင်ရေးနှင့်ပေါင်းစပ်။ အသုံးပြုနိုင်သည်။

နိဂုံးနှင့်အရေးယူမှခေါ်ဆိုပါ

နိဂုံးချုပ်အနေဖြင့်ပြန်လည်တည်ဆောက်ခြင်းသည်ပြန်လည်ထူထောင်ခြင်းဆိုင်ရာပြန်လည်ထူထောင်မှုနှုန်းသည်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးနှုန်းအပေါ်သိသိသာသာသက်ရောက်မှုရှိသည်။ ဤဆက်နွယ်မှုကိုနားလည်ခြင်းသည်မော်လီကျူးဇီဝဗေဒသုတေသနနှင့်ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာ applications များတွင်စမ်းသပ်အခြေအနေများကိုပိုမိုကောင်းမွန်အောင်လုပ်ရန်မရှိမဖြစ်လိုအပ်သည်။

ယုံကြည်စိတ်ချရသော recombinase ပေးသွင်းသူတစ် ဦး အနေဖြင့်ကျွန်ုပ်တို့သည်အရည်အသွေးမြင့်မားသောထုတ်ကုန်များနှင့်ကောင်းမွန်သောဖောက်သည်ဝန်ဆောင်မှုကိုထောက်ပံ့ရန်ကတိကဝတ်ပြုထားသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ကျွမ်းကျင်သူအဖွဲ့များသည်ကျွန်ုပ်တို့၏ပြန်လည်ထူထောင်ရေးထုတ်ကုန်များကိုရွေးချယ်ခြင်းနှင့်အသုံးပြုခြင်းနှင့် ပတ်သက်. သင့်အားကူညီရန်သင့်အားကူညီရန်ရရှိနိုင်သည်။ သင်အခြေခံသုတေသနပြုခြင်းသို့မဟုတ်ဇီဝနည်းပညာဆိုင်ရာအပအသစ်များကိုတီထွင်ခြင်းရှိမရှိ, သင်၏ပန်းတိုင်များအောင်မြင်ရန်လိုအပ်သည့်ထုတ်ကုန်များနှင့်ထောက်ခံမှုကိုကျွန်ုပ်တို့ပေးနိုင်သည်။

အကယ်. သင်သည်ကျွန်ုပ်တို့၏ပြန်လည်ထူထောင်ရေးထုတ်ကုန်များအကြောင်းပိုမိုလေ့လာရန်သို့မဟုတ်သင်၏သုတေသနအတွက်သတ်သတ်မှတ်မှတ်လိုအပ်ချက်များရှိပါကသင်ခန်းစာယူရန်ကျွန်ုပ်တို့အားအခမဲ့ဆက်သွယ်ပါ။ မော်လီကျူးဇီဝဗေဒကိုတိုးတက်အောင်သင်နှင့်အတူအလုပ်လုပ်ရန်ကျွန်ုပ်တို့မျှော်လင့်ပါသည်။

ကိုးကားခြင်း

1. kowalczykowski, SC (2000) ။ မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာအကြံပြုချက်များနှင့်ပြန်လည်စုစည်းခြင်း - မှီခိုပုံတူပွားခြင်း။ ဇီဝဓါတုဗေဒသိပ္ပံသိပ္ပံပညာ, 256 - 165 ။
2. အနောက်, SC (1996) ။ ပြန်လည်ထူထောင်ရေးပရိုတိန်းနှင့်၎င်းတို့၏ထိန်းချုပ်မှု၏မော်လီကျူးအမြင်များ။ သဘာဝ, 383 (6604), 91 - 96 ။
3. Friedberg, EC, Walker, GC, Siede, W. , Wood, Rd, Schultz, Schultz, Ra နှင့် Ellenerberger, T. (2006) ။ DNA ပြုပြင်ခြင်းနှင့် Mutagenesis ။ ASM စာနယ်ဇင်း။